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马大龙 教授(中心主任)
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王露 教授
王应 教授
赵红珊 教授
黄晶 副教授
张颖妹 副主任技师
宋泉声
王平章
吕平
李婷
莫晓宁
唐玉红(中心秘书)

王应 教授>>

一.联系方式:

王应,博士,教授,博士生导师

电话:+8610 82802846—5032

Email: yw@bjmu.edu.cn

.研究方向和研究内容:

目前主要研究方向:

人类新趋化因子的发现、鉴定、功能和作用机制的研究,及其相关自主创新药物的研发

研究内容:

1人类新趋化因子的表达、功能和作用机制的研究:

1从人类基因组编码基因中发现潜在的新趋化因子,并进行表达、功能、机制的研究

本课题组自2010年,国家人类基因组北方中心功能基因组合作以全基因组人类蛋白编码基因数据库为背景,根据趋化因子的特点确立生物信息学筛选标准,最后确定了62个重点候选基因用于本课题组建立的的趋化功能筛选平台。目前正在对筛选出的4个新趋化活性细胞因子开展系统性的研究,包括寻找这些新趋化活性细胞因子的相互作用受体、表达组织细胞、与生理病理过程相关性及作用机制。

已在The Journal of ImmunologyJournal of Cell Science上首次报道了本课题组原创性发现的系列分子PSMP是一个CCR2的高亲和力配体(J. Immunol. 2014 Feb 15;192 (4):1878-86.),FAM3D是一个FPR1FPR2的配体J Cell Sci. 2016, 129, 1831-1842.)。目前发现PSMPFAM3D与多个人体病理生理过程相关,正在开展PSMPFAM3D在病理生理过程中作用及机制的研究。

2)趋化素样因子1CKLF1)及其C端肽相互作用受体及作用机制的研究

本课题组在国际上首次报道了CKLF1通过CCR4发挥趋化功能。利用果蝇表达系统,表达纯化分泌形式的CKLF1,经N端测序,得到两种分泌形式多肽,即CKLF1 C端多肽C19C27CKLF1和其C端多肽均可以作用于CCR4受体,C27趋化效应较强,C19较弱(Int. J. Biochem. Cell. Biol.2008; 40: 909-919.)。

CKLF1在哮喘等多种自身免疫病、过敏性疾病中表达上调并促进病理性炎症过程。CCR3CCR4介导的炎症与哮喘病理过程密切相关。CKLF1-C19肽弱的趋化因子受体活化作用和较强的受体去敏感能力,使它成为趋化因子受体拮抗肽。我们的研究结果显示C19肽不仅可拮抗CKLF1的趋化功能,还可拮抗CCR3CCR4多种趋化因子及受体介导的细胞趋化功能。在小鼠体内过敏性鼻炎和哮喘(与浙江大学呼吸病研究所合作完成)模型中,C19能够抑制鼻部和肺部呼吸道Th2细胞和嗜酸性粒细胞等炎症细胞浸润并降低气道高反应性,而C27有增强的趋势(Allergy, 2011, 66: 287–297.; International Immunopharmacology, 2011, 11, 2188-2193.)。

2新趋化因子相关自主创新药物的研发:

1CKLF1及其C端肽C19

CKLF1-C19肽作为抗过敏性鼻炎和过敏性哮喘治疗药物的可行性和优势在于:CKLF1-C19多肽药物开发的适应症为过敏性哮喘、过敏性鼻炎的治疗,具有良好的市场前景;CKLF1-C19多肽源自人体内源蛋白CKLF1,仅有19个氨基酸属于小分子多肽药物,其化学合成产物具有生物活性,易于大规模低成本的工业化生产;CKLF1-C19在过敏性鼻炎、过敏性哮喘动物模型中均表现出良好的炎症抑制作用CKLF1-C19肽机制研究显示,CKLF1-C19肽可拮抗CCR3CCR4多种趋化因子及受体介导的炎症细胞迁移。符合趋化因子及受体为靶点药物的未来发展趋势,即多靶点拮抗药物;CKLF1-C19多肽局部滴鼻给药具有良好的药效,与过敏性鼻炎一线治疗激素类药物布地奈德疗效相似。因此CKLF1-C19有望成为新的抗过敏多肽药物。

CKLF1-C19多肽专利已获中国(ZL200410098627.1)和美国专利授权(US 7465453 B2)。正在寻求企业开发CKLF1-C19抗过敏多肽药物。

2)针对CKLF1CCR4的相互作用设计、发现和获取小分子化合物及其炎症干预作用的研究:

Th2细胞及其产生的细胞因子是重要的过敏性炎症的始动因素,因此拮抗Th2的药物有可能成为治疗过敏性炎症最有效的药物趋化因子受体CCR4是介导Th2细胞浸润的重要趋化因子受体,因此CCR4成为治疗过敏性鼻炎和过敏性哮喘的重要靶点。

CKLF1与多种自身免疫性疾病、过敏性疾病的炎症过程密切相关,因此CKLF1是一个抗炎治疗新靶点。本课题组与军事医学科学院毒物药物研究所及北京大学药学院药物分析教研室合作,基于计算机模拟CKLF1及其C端肽与CCR4的相互作用,已设计、合成一系列有新颖结构的化合物,利用趋化抑制实验和毛细管电泳技术筛选出一些化合物与受体结合并具有趋化抑制作用。获得强效化合物后,在体内外研究了其构效关系,已获得一新型小分子化合物,在小鼠体内过敏性鼻炎和哮喘(与浙江大学呼吸病研究所合作完成)模型中具有很好疗效

3PSMP抗体药物:

本课题组制备了PSMP蛋白的小鼠单克隆抗体,具有中和活性。在PSMP相关的疾病动物模型中,PSMP的小鼠单克隆抗体表现出显著的治疗作用。相关研究正在进行中。

3CMTM家族分子的研究——CMTM8CMTM2分子的表达、功能及作用机制的研究:

CMTM8CKLF家族成员之一,含有四次跨膜结构。已发现CMTM8是参与受体转运和信号调控的分子,其加速转铁蛋白受体和EGFR的内化,抑制EGFR活化信号及细胞增殖、ERK磷酸化(J CELL PHYSIOL, 2007211, 112-120.;FEBS Letter, 2005, 579(28), 6375-6382.)。CMTM8在肿瘤细胞中过表达可以逆转肿瘤细胞的EMT过程,如在肿瘤细胞中敲减CMTM8的表达可加剧肿瘤细胞的EMT过程,侵袭和迁移能力增强CMTM8调节HepG2肿瘤细胞EMT的分子机制主要是通过c-MET-ERK来介导的(J Biol Chem, 2012, 287, 11850-8.)。

利用CMTM8抗体免疫组化分析,发现在多种肿瘤组织中CMTM8表达降低,与癌边缘组织中CMTM8表达相比具有显著差异。CMTM8的表达及功能研究提示CMTM8在多种肿瘤的发生、发展中可能起着关键作用,并有望成为一个临床诊断肿瘤发展、预后及拟订治疗方案的标志分子。临床相关研究正在与北京大学人民医院、北京大学第三医院合作进行中。

CMTM2CKLF家族成员之一,含有四次跨膜结构。CMTM2在睾丸、骨髓、外周血白细胞、前列腺组织中高表达。我们发现二氢睾酮刺激LNCaP细胞可上调CMTM2表达,人CMTM2上调雄激素受体转录活性,说明CMTM2与雄激素受体相互关联。此外,CMTM2上调雄激素受体转录功能的机制涉及CMTM2抑制AKT活性,因AKT活化促进雄激素受体泛素化降解,而CMTM2抑制了雄激素受体泛素化降解,增加了雄激素受体蛋白水平稳定性,进而上调雄激素受体转录功能(Chinese Science Bulletin, 2009, 54, 1050-1057.)。

4PDCD5作为生物大分子跨细胞膜转运及应用研究:

PDCD5是本中心在国际首次克隆的促凋亡基因。PDCD5在正常组织表达广泛,多种肿瘤表达下调。PDCD5具有促进凋亡和促进Parapotosis的效应。PDCD5单独不能对细胞产生明显的影响,但加入诱导凋亡的因素如撤除细胞因子、撤除血清、化疗药物处理、抗FAS 抗体处理、射线照射等,均可明显促进其凋亡。封闭下调内源性的PDCD5可抑制细胞凋亡。

大肠杆菌可高效表达人重组PDCD5蛋白。我们发现在细胞培养基中添加外源人重组PDCD5蛋白,同样可促进撤除细胞因子、撤除血清或化疗药物处理等所诱导的细胞凋亡。一般来说蛋白质分子不能穿过细胞膜,然而某些具有穿细胞膜转导作用的蛋白例外。PDCD5蛋白可以通过细胞表面的硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPGs)、窖蛋白小泡(caveolae)/脂筏介导的胞吞作用进入细胞(J Biol Chem,2006, 281, 24803-17.)。

根据肿瘤治疗现状来看,化学药物治疗仍然是目前主要的治疗手段之一,但由于化疗药的毒性作用,限制了化疗的应用。化疗增敏剂可在较低化学药物浓度或剂量情况下,降低其对正常组织细胞毒性,产生抗肿瘤细胞的协同效应,提高化学药物疗效,具有重要的临床意义(Biochemical and Biophysical Research Communications, 2010,396: 224–230.; Chinese Science Bulletin, 2009, 54, 3981-3989.)。外源性人重组PDCD5蛋白的可进入细胞并具有促细胞凋亡作用,提示人重组PDCD5蛋白有可能作为新的基因工程药物与化疗药物联合治疗肿瘤。

.主持的科研项目:

2015.1-2018.12国家自然科学基金面上项目“人CCR2新的高亲和力配体PSMP的表达,及其在非可控炎症恶性转化中作用和机制的研究”

2015.1-2017.12北京市自然科学基金面上项目“人新趋化细胞因子PSMP在肝病发展和转归过程中作用的研究”

2013.1-2016.12国家自然科学基金面上项目从人类基因组编码基因中发现潜在的新趋化因子,并进行表达、功能、机制的研究

2012.1-2016.8 973计划重大心血管疾病相关GPCR新药物靶点的基础研究(课题骨干)

2013.1-2015.12高等学校博士学科点专项科研基金新趋化因子趋化作用机制的研究

2011.1-2013.12国家自然科学基金面上项目“CMTM8及其变异体在肿瘤细胞上皮间质转化中的作用及机制研究

2009.1-2010.12科技部重大新药创制科技重大专项趋化素样因子1衍生多肽作为候选新药的研究与开发

2009.1-2011.12国家自然科学基金重大研究计划培育项目针对CKLF1与趋化因子受体的相互作用设计、发现和获取小分子化合物及其炎症干预作用的研究

2009.1-2011.12国家自然科学基金面上项目“CKLF1趋化作用机制的研究

2007.1-2009.12国家自然科学基金面上项目“CMTM8在细胞因子受体转运和信号转导中调控作用的研究

2003.1-2005.12国家自然科学基金面上项目人趋化素样因子相关蛋白2的结构与功能研究

.已取得的研究成果:

近年发表论文(*责任作者)

  1. Xinjian Peng, Enquan Xu, Weiwei liang, Xiaolei Pei, Dixin Chen, Danfeng Zheng, Yang zhang, CanZheng, Pingzhang Wang, Shaoping She, Yan Zhang, Jing Ma, Xiaoning Mo, Dalong Ma & Ying Wang*. Identification of FAM3D as a newendogenous chemotaxis agonist for the formyl peptide receptors. J Cell Sci. 2016 Mar 10, 129, 1831-1842.
  2. Xiaolei Pei, Qianying Sun, Yan Zhang, Pingzhang Wang, XinjianPeng, Changyuan Guo, Enquan Xu, Yi Zheng, Xiaoning Mo, Jing Ma, Dixin Chen, Yang Zhang, Yingmei Zhang, Quansheng Song, Shuai Guo, Taiping Shi, Zhixin Zhang, Dalong Ma, Ying Wang*. PC3-secreted microprotein is a Novel Chemoattractant Protein and Functions as a High Affinity Ligand for CC Chemokine Receptor 2. J. Immunol. 2014 Feb 15;192 (4):1878-86.
  3. Wenjuan Zhang, Michelle Mendoza, Xiaolei Pei, Sarah Mahoney, Didem Ilter, Yingmei Zhang, Dalong Ma, John Blenis*, Ying Wang*. Down-regulation of CMTM8 induces EMT-like changes and cell motility through c-MET-ERK signaling. J Biol Chem, 2012, 287, 11850-8.
  4. Linjie Tian, Wen Li, Jiaoli Wang, Yan Zhang, Yi Zheng, Hui Qi, Xiaohuan Guo, Yingmei Zhang, Dalong Ma, Huahao Shen*, Ying Wang*. The CKLF1-C19 peptide attenuates allergic lung inflammation by inhibiting CCR3- and CCR4- mediated chemotaxis in a mouse model of asthma. Allergy, 2011, 66: 287–297.
  5. Ying Wang, Dan Li,Hui Fan, Linjie Tian, Yingcheng Zhong, Yingmei Zhang,Lan Yuan,Caining Jin, Caihua Yin, Dalong Ma. Cellular uptake of exogenous human PDCD5 protein. J Biol Chem,2006, 281, 24803-17.
  6. Denghui Gao*, Hao Hu*, Ying Wang, Weidong Yu, Jianhua Zhou, Xiaofeng Wang, Weiping Wang, Chunyan Zhou and Kexin Xu. CMTM8 inhibits the carcinogenesis and progression of bladder cancer. ONCOLOGY REPORTS 34: 2853-2863, 2015
  7. Wenjuan Zhang, Hui Qi, Xiaoning Mo, Qianying Sun, Ting Li, Quansheng Song, Kexin Xu, Hao Hu, Dalong Ma, Ying Wang*. CMTM8 is frequently downregulated in multiple solid tumors. Appl Immunohistochem Mol Morphol, 2015 Nov 16. [Epub ahead of print].
  8. Shiying Zhang, Xiaolei Pei, Hao Hu, Wenjuan Zhang, Xiaoning Mo, Kexin Xu*, Ying Wang*, Yanqun Na. Functional characterization of the tumor-suppressor CMTM8 and its associated with prognosis in bladder cancer. Tumor Biology, 2015Nov 28. [Epub ahead of print].
  9. Libao Xu, Yang Zhang, Wenjie Dai, Ying Wang, Dan Jiang, Lili Wang, Junhai Xiao*, Xiaohong Yang*, Song Li. Design, Synthesis and SAR study of Novel Trisubstituted Pyrimidine Amide derivatives as CCR4 Antagonists. Molecules, 2014, 19(3), 3539-3551.
  10. 马靖,裴晓磊,张扬,王应*PSMP重组蛋白在CHO细胞中表达纯化及功能鉴定。北京大学学报(医学版)2014, 46(5), 669-675. (论著,核心期刊)
  11. 林乐涛(本科生),王应*趋化因子在炎性肾损伤中的作用,中华微生物学和免疫学杂志,2014, 34, 886-890.
  12. Pazilaiti Yakufu, Hui Qi, Meina Li, Xiaomei Ling*, Wenjing Chen, Ying Wang*. CCR4expressingcellsculturedadherentlyon acapillarywallandformaldehyde-fixedas thestationaryphasefor ligandscreeningbyACE. Electrophoresis.2013, 34: 531-40.
  13. Wei Sun, Linjie Tian, Hui Qi, Dan Jiang, Ying Wang, Song Li, Junhai Xiao*.Design and Synthesis of Tri-substituted Chiral Pyrrolidin-2-one Derivatives as CCR4 Antagonists. Chinese Journal of Chemistry. 2013; 31(7):1144-1152. (IF 0.92)
  14. Hui Qi, Yi Zheng, Enquan Xu, Changyuan Guo, Yan Zhang, Qianying Sun,Junhai Xiao, Dalong Ma, Ying Wang*.An antagonist for CCR4 alleviates murine allergic rhinitis by intranasal administration. International archives of allergy and immunology. 2012, 159, 297-305.
  15. Chen, Wenjing; Li, Meina; Yakufu, Pazilaiti; Ling, Xiaomei*; Qi, Hui; Xiao, Junhai; Wang, Ying*. Immobilizing CC chemokine receptor 4's N-terminal extracellular tail on a capillary to study its potential ligands by capillary electrophoresis. Analytical Biochemistry, 423(1), pp 1-6, 2012/4/1.
  16. Hongwei Gong, Hui Qi, Wei Sun, Yang Zhang, Dan Jiang, Junhai Xiao*, Xiaohong Yang*, Ying Wang and Song Li. Design and Synthesis of a Series of Pyrido[2,3-d]pyrimidine Derivatives as CCR4 Antagonists. Molecules.2012, 17(8), 9961-9970. (IF 2.386)
  17. Yi Zheng, Changyuan Guo, Yan Zhang, Hui Qi, Qianying Sun, Enquan Xu, Yingmei Zhang, Dalong Ma, Ying Wang*. Alleviation of murine allergic rhinitis by C19, a C-terminal peptide of chemokine-like factor 1 (CKLF1). International Immunopharmacology, 2011, 11, 2188-2193.
  18. 王应,马大龙。新细胞因子趋化素样因子(CKLF1)的发现与新药开发。中国药学杂志,2011, 46: 241-244.
  19. Yan Zhang; Linjie Tian; Yi Zheng; Hui Qi; Changyuan Guo; Qianying Sun; Enquan Xu; Yingmei Zhang; Dalong Ma; Ying Wang*. C-terminal peptides of Chemokine-like factor 1 signal through chemokine receptor CCR4 to cross-desensitize the CXCR4. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2011, 409: 356-361.
  20. Shuyu Zhang, Hui Qi, Pazilaiti Yakufu, Fang Zhao, Xiaomei Ling*, Junhai Xiao and Ying Wang*. Screening of thiourea derivatives and carbonyl-2-aminothiazole derivatives for potential CCR4 antagonists using capillary zone electrophoresis. Journal of Chromatography B, 2011, 879: 75-82.
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  22. Lanjun Xu, Yingyu Chen, Quansheng Song, Dong Xu, Ying Wang and Dalong Ma*. PDCD5 interacts with Tip60 and functions as a cooperator in acetyltransferase activity and DNA damage-induced apoptosis. Neoplasia,2009, 11, 345-354.
  23. Dongxu FU, Linjie TIAN, Zhi PENG, Weiwei DENG, Jinsong YUAN, Dalong MA, Taiping SHI*, Dianjun LI*and Ying Wang*. Overexpression of CHMP6 Induces Cellular Oncosis and Apoptosis in HeLa Cells. Biosci Biotechnol Biochem, 2009, 73, 494-501.
  24. Yanfang Wang, Lin Shi, Quansheng Song, Yingmei Zhang, Yaxin Lou, Yi Zheng, Dalong Ma, Ying Wang*, Xiaoyan Ke*. Recombinant Human PDCD5 Protein Enhances Chemosensitivities of Hematologic Malignancies.Chinese Science Bulletin, 2009, 54, 3981-3989.
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  26. Fang Zhao, Jun Hai Xiao, Ying Wangand Song Li. Synthesis of thiourea derivatives as CCR4 antagonists. Chinese Chemical Letters, 2009, 20, 296-299.
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  28. Dazhen Liu,Caihua Yin,Yingmei Zhang, Linjie Tian, Ting Li, Dan Li, Dalong Ma,Yinglu Guo, Ying Wang*.HumanCMTM2/CKLFSF2 Enhances Androgen Receptor’sTranscriptional Activity.Chinese Science Bulletin, 2009, 54, 1050-1057.
  29. Yi Liu, Shuyu Zhang, Xiaomei Ling*, Yuzhen Li, Yingmei Zhang, Wenling Han, and Ying Wang*, Analysis of the interactions between the peptides from secreted human CKLF1 and heparin using capillary zone electrophoresis. Journal of Peptide Science, 2008,14, 984-988.
  30. Ying Wang, Yingmei Zhang, Wenling Han, Dan Li, Linjie Tian,Caihua Yin, Dalong Ma*. Two C-terminal peptides of human CKLF1 interact with chemokine receptor CCR4. Int.J.Biochem.Cell.Biol.2008, 40: 909-919.
  31. Zhe Sun, Xiaomei Ling*, Wei Sun, Junhai Xiao, Caihua Yin, Ying Wang*. Studies on the interactions between lactam analogs and the N-terminal extracellular tail of CC chemokine receptor 4 by capillary zone electrophoresis. Electrophoresis. 2007,28, 3064-3069.
  32. Dan Li, Caining Jin, Bo Pang, Yingmei Zhang, Caihua Yin, Linjie Tian, Wenling Han,Dalong Ma, Ying Wang*.An alternative splice form of CMTM8 induces apoptosis.Int.J.Biochem.Cell.Bio.2007, 39, 2107–2119.
  33. Ling Xiaomei, Liu Yi, Fan Hui, Zhong Yingcheng, Li Dan, Wang Ying*. Studies on interactions of programmed cell death 5 and its related peptides to heparin by capillary zone electrophoresis. Analytical and Bioanalytical Chemistry. 2007, 387, 909-916.
  34. 钟英成石爽张颖妹莫晓宁刘大振宋泉声韩文玲王应*.人类新细胞因子CKLFSF2羧基端蛋白在大肠杆菌中的表达纯化、抗体制备与鉴定.生物化学与生物物理进展。2007, 34(1), 93~99
  35. Caining Jin, Ying Wang, Wenling Han, Yingmei Zhang, Qihua He, Dan Li, Caihua Yin, Linjie Tian, Dazhen Liu, Quanshen Song, Dalong Ma*. CMTM8 induces caspase-dependent and -independent apoptosis through a mitochondria-mediated pathway.J CELL PHYSIOL, 2007211, 112-120.
  36. Ying Wang, Yingmei Zhang, Xue Yang, Wenling Han, Yanan Liu, Qianmei Xu, Rui Zhao, Chunhui Di,Quansheng Song, Dalong Ma*. Chemokine-Like Factor 1 Is a Functional Ligand for CC Chemokine Receptor 4 (CCR4). Life Sciences, 2006, 78, 614-621.
  37. Ting Li, Wenling Han, Tian Yang, Peiguo Ding, Min Rui, Dazhen Liu, Ying Wang, Dalong Ma.Molecular Cloning and Identification of Mouse Cklfsf2a and Cklfsf2b, Two Homologues of Human CKLFSF2. Int.J.Biochem.Cell.Bio.2006, 38, 420-429.
  38. Caining Jin, Peiguo Ding, Ying Wang, Dalong Ma*. Regulation of EGF receptor signaling by the MARVEL domain-containing protein CKLFSF8. FEBS Letter, 2005, 579(28), 6375-6382.
  39. Shuang Shi, Min Rui, Wenling Han, Ying Wang, Xiaoyan Qiu, Peiguo Ding, Pei Zhang, Xiaohui Zhu, Yingmei Zhang, Qini Gan, Dalong Ma*. CKLFSF2 is highly expressed in testis and can be secreted into the seminiferous tubules. International Journal of Biochemistry and Cell Biology, 2005, 37, 1633-1640.

 

授权专利:

  1. US 7465453 B2, 11/810,590, PCT/CN2005/002179: Polypeptide fragments of CKLF1. Ying Wang, Yingmei Zhang, Wenlin Han, Dalong Ma, Yanan Liu, Caining Jin, Linjie Tian, Dan Li.
  2. ZL200410098627.1。王应,张颖妹,韩文玲,马大龙等。具有多种功能的多肽。
    1. ZL200810180203.8。李松、王应、赵芳、马大龙、肖军海、凌笑梅、孙薇、田林杰、王莉莉、綦辉、钟武、张姝玙、郑志兵、谢元、谢云德、李行舟、赵国明、王晓奎、周辛波、刘洪英。芳酰胺基噻唑类衍生物及其制备方法和医疗用途。
    2. ZL200810180204.2。李松、王应、孙薇、马大龙、肖军海、凌笑梅、赵芳、田林杰、王莉莉、綦辉、郑志兵、孙哲、钟武、谢元、谢云德、李行舟、赵国明、周辛波、王晓奎、刘洪英。三取代的手性内酰胺类衍生物及其制备方法和用途。
    3. ZL201010267997.9。凌笑梅;帕孜来提×亚库甫;王应;綦辉;张颖妹。贴壁培养细胞层作为固定相的毛细管及其制备方法和用途。

自主研发的创新药物及成果转让:

CKLF1-C19肽作为抗过敏性鼻炎和过敏性哮喘治疗药物正在寻求企业转让开发,详见CKLF1-C19多肽药物开发简介

科研合作及意向:

可以提供CKLF1C端多肽,我们自主研发的CCR4小分子化合物拮抗剂、PSMP重组蛋白、FAM3D重组蛋白;可以提供PSMPFAM3DCMTM8CMTM8-v2CMTM2的表达质粒、腺病毒、引物、抗体及siRNAshRNA质粒供感兴趣的临床和基础实验室合作开展功能研究和疾病相关研究。

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